فن آوری بن یاخته

میکرو RNA ها، گروهي از RNA هاي کوچک غير رمزگذار (ncRNA) به طول ۲۲ نوکلئوتيد هستند که در کنترل بسياري از فرايندهاي سلولي و تکاملي گياهان و حيوانات از طريق تنظيم رخدادهاي اپي ژنيک، ساختمان کروماتين، خاموشي ژني پس از رونويسي و يا مهار ترجمه نقش دارند. امروزه، با توجه به نقش مهم میکرو RNA ها در فرایندهای سلولی، مطالعات زیادی در این زمینه انجام گرفته و پروژه های کلانی در حوزه تحقیقاتی به منظور شناساییmiRNA  ها به عنوان بیومارکر بیمارهای مختلف و یا ایجاد فرآورده های درمانی علیه سرطان و … اختصاص یافته است. لذا، یکی از پرفروش ترین و پر متقاضی ترین محصولات در شرکتهای بزرگ و مطرح بیوتکنولوژی دنیا کیت های سنجش miRNA است. کیت ارائه شده توسط محققان بن یاخته، کیت همه منظوره اندازه گیری کمی microRNA ها در نمونه های زیستی از محصولات عرصه زیست فناوری می باشد. تولید این کیت به منظور تسریع و تسهیل فرایندهای تحقیقاتی در زمینه RNA های غیر کد کننده که به پروتئین ترجمه نمی شوند می باشد. این محصول در قالب کیت کامل که حاوی تمامی مواد لازم برای انجام هدف اصلی محصول که سنجش کمی میزان بیان microRNA ها در نمونه های زیستی شامل نمونه های خون، پلاسما، سرم، مایعات بدن مانند ادرار، بافت، انواع سلول های سرطانی و غیرسرطانی مانند سلول های بنیادی جنینی یا خون ساز می باشد، طراحی و عرضه می گردد. بر این اساس خریداران این محصول بی نیاز از خرید مواد و محصولات جانبی نظیر سایر آنزیم های سنتزی که در موارد مشابه ضروری می باشد هستند.سیستم qPCR BONmiR روشی سریع و آسان برای اندازه‌گیری کمی دقیق microRNA ها توسط real-time PCR می باشد. این روش از ماده معمول SYBR® Green در متد ساده دو مرحله ای PCR برای اندازه‌گیری تمامی RNA های نمونه بهره می‌برد.کفایت انجام یک واکنش سنتز ۱st strand cDNA برای تمامی microRNA ها (عدم نیاز به سنتز یک cDNA برای هر miR)، ایده‌آل برای نمونه‌های با میزان کم RNA مانند سرم و پلاسما، حساسیت بالا (نیاز به microRNA به میزان فقط µg1) و پروتکل سریع و روش انجام PCR دو مرحله‌ای آسان (نیاز به زمان کمتر از ۳ ساعت) جزو محاسن کلیدی کیت می باشد که استفاده از آن را سریع، ساده اما با دقت بالا می سازد. لذا می توان از این کیت در کلیه مراکز تحقیقاتی، پژوهشی و دانشگاههای که مطالعات فراوانی در زمینه miRNA ها انجام می دهند، استفاده نمود.در

در فرآیند استخراج RNA، کل موجودی RNA در یک نمونه مورد آزمایش (شامل نمونه هموژنیزه از سلول یا بافت) از سایر محتویات از جمله پروتئین ها جدا می گردد. این پروسه پیش نیاز برخی دیگر از فرآیند های مرسوم در تکنولوژی زیستی از جمله RT-PCR و Northern blotting و … می باشد.محصول BON RNA Lysis buffer ساخته شده توسط شرکت بن یاخته، حاوی عوامل Chaotropic بوده که با تغییر فولدینگ ریبونوکلئازها از فعالیت آن ها و لذا تخریب RNA جلوگیری می نماید. این محصول با دارابودن حساسیت و بازدهی بالا، برای تخلیص و استخراج RNA از سلول و بافت مناسب می باشد.

تکثیر microRNA به کمک Real-time PCR یکی از پر کاربردترین تکنیک ها در حوزه تحقیقاتی microRNA می باشد. با این وجود، طول کوتاه miRNA ها، شناسایی و تکثیر آنها را با متدهای معمول QRT-PCR دشوار ساخته است. از طرفی سلولهای تخمک و سلولهای مرحله جنینی در مراحل مرولا و بلاستوسیت، معمولا بسیار کم هستند که این امر جداسازی RNA را باکیفیت و در غلظت مناسب دشوار می سازد. در کیت حاضر برای غلبه بر مشکلات مذکور، به صورت مستقیم ابتدا BONLysis بر روی سلولهای جنینی ریخته شده و سپس به طور مستقیم سنتز DNA صورت می گیرد. پس از این مرحله واکنش اندازه گیری کمی Real-time PCR روی cDNA ساخته شده انجام می شود.

این موش­‌ها از نسل موش C57Bl/6 هستند که با انتقال ژن Green Fluorescent Protein (GFP) تحت کنترل پروموتر  chicken beta-actin  ایجاد شده­‌اند. این موش‌­های تراریخت ژن مذکور را در تمام سلول­‌های بدن بجز اریتروسیت و مو به صورت یکنواخت بیان می­‌کنند و کاربردهای وسیعی در مطالعات پیوند بافت و سلول به منظور ردیابی پس از پیوند دارد. این مدل کاربردهای زیادی در زمینه‌های مختلف دارد ولی بیشترین استفاده آن می‌تواند در مطالعات مربوط به ردیابی سلول‌ها پس از پیوند در مطالعات سلول‌درمانی و مهندسی بافت باشد.مرکز تحقیقاتی مهندسی ژنوم این موش ها را از همکاران ژاپنی این مرکز دریافت کرده و اجازه نامه تکثیر و فروش تجاری این موش ها را دارا می باشد. همچنین سلامت این موش ها توسط تست های مختلف ژنتیکی تایید شده و هیچ گونه فنوتیپ غیر معمولی در این موش ها مشاهده نشده است.